通过激活和抑制叉头状转录因子O1 (FoxO1)活性及表达，探讨其对高糖培养下大鼠肾小球系膜细胞(MCs)氧化应激的作用。
方法采用脂质体转染法将FoxO1短发夹样RNA(FoxO1 shRNA)质粒载体稳定转染MCs；用高糖(30.0 mmol/L)和白藜芦醇(Resv 20.0 μmol/L)培养稳定转染后的MCs。以5.6 mmol/L葡萄糖培养的MCs为正常对照组(NG)，将高糖培养的MCs分为5组：单纯高糖组(HG)、HG＋Resv组、HG＋FoxO1shRNA转染组、HG＋Resv＋FoxO1 shRNA转染组、HG＋转染阴性对照组(shNC)。培养72 h后，用荧光酶标仪检测各组MCs内活性氧(ROS)水平；逆转录聚合酶链反应(RT－PCR)检测去乙酰化酶(Sirt1)、FoxO1、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)mRNA表达；Western blotting法检测FoxO1及磷酸化FoxO1(p－FoxO1)水平。多组间数据比较采用单因素方差分析。
结果与NG组相比，HG组Sirt1 mRNA表达下降，p－FoxO1水平升高，MnSOD mRNA表达下降，ROS水平升高，差异均有统计学意义(t＝12.38、13.27、14.13、8.36，均P<0.05)。与HG组相比，HG＋FoxO1shRNA转染组FoxO1mRNA表达被抑制，MnSOD mRNA表达更低，ROS水平更高，差异均有统计学意义(t＝20.61、13.61、10.13，均P<0.05)；HG＋Resv组Sirt1 mRNA表达升高，p－FoxO1水平下降，MnSOD mRNA表达升高，ROS水平下降，差异均有统计学意义(t＝6.02、10.69、5.39、5.37，均P<0.05)。与HG＋Resv组比较，HG＋Resv＋FoxO1shRNA转染组，FoxO1mRNA表达被抑制，MnSOD mRNA表达降低，ROS水平升高，差异均有统计学意义(t＝22.53、15.31、14.63，均P<0.05)。
结论FoxO1是调节MCs内ROS水平的重要转录因子，其可能通过激活下游抗氧化靶基因MnSOD的表达，保护MCs对抗氧化应激。