构建结肠癌COLO耐药株，探索其功能特性及其与肿瘤干细胞的关系。
方法通过逐渐递增化疗药5-氟尿嘧啶(5-FU)浓度的方法，构建了耐0.10 μmol/ml和0.20 μmol/ml 5-FU的结肠癌COLO耐药株各1株，分别命名为COLO/5-FU-1、COLO/5-FU-2。从增殖能力、克隆形成能力、迁移和侵袭能力、微球体形成能力、干性基因的表达、交叉耐药等方面与亲本结肠癌细胞株COLO进行对比。
结果在存活检测中，常规培养后第4天，结肠癌耐药株COLO/5-FU-2、COLO/5-FU-1、亲本COLO细胞的A值分别为0.61±0.13、0.54±0.07、0.41±0.09，差异有统计学意义(F＝63.43，P＝0.033)。随着耐5-FU药物浓度的增加，COLO耐药株的克隆形成率逐渐增强，COLO/5-FU-2、COLO/5-FU-1、亲本COLO的克隆形成率依次为(87.6±12.7)%、(65.3±9.7)%、(38.5±7.6)%，差异有统计学意义(F＝33.64，P＝0.017)。COLO/5-FU-2、COLO/5-FU-1、亲本COLO每高倍视野中迁移穿过基底膜的细胞数分别为(482±39)个、(434±45)个、(373±38)个，侵袭穿过基底膜的细胞数分别为(174±42)个、(112±31)个、(87±29)个，差异均有统计学意义(F＝109.61，P＝0.009；F＝67.31，P＝0.032)。与亲本结肠癌细胞株COLO比较，耐药株表达更高的干性基因，差异有统计学意义(F＝47.31，P＝0.042)；且耐药株对其他化疗药如米托蒽醌存在交叉耐药[如给药96 h，米拖蒽醌对亲本COLO的抑制率高于COLO/5-FU-1、COLO/5-FU-2 (0.749±0.042、0.423±0.024、0.342±0.018)，差异有统计学意义 (F＝12.61, P＝0.028)]。COLO/5-FU-2、COLO/5-FU-1、亲本COLO细胞的微球体形成率依次为(8.90±0.97)%、(6.20±0.75)%、(3.90±0.32)%，差异有统计学意义(F＝164.32，P＝0.006)。
结论结肠癌COLO耐药株有肿瘤干细胞样细胞的特点，是富集了的肿瘤干细胞。