目的研究和探讨粒/巨噬细胞集落刺激因子(Gm-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)联合诱导制造的树突细胞(DC)疫苗对大鼠肝癌微环境下Treg细胞表达的影响,为将来临床制备高效的肿瘤疫苗提供理论依据。方法从健康志愿者血液中提取单核细胞,利用Gm-CSF、IL-4联合诱导分化为DC,在第3、5、8天时测细胞,成功诱导成熟DC后与T淋巴细胞共培养7 d,分别在第0、3、5、7天时检测CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例,同时将DC负载肿瘤抗原,制备DC疫苗。采用饮用二乙基亚硝水溶液的方法制造肝癌荷瘤大鼠模型30例,分为模型对照组与DC疫苗组。每组各15只,DC疫苗组分别于造模后第2、5、8周的周一、三、五、七皮下多点注射DC疫苗,模型组皮下注射等量生理盐水,最后一次注射的3周后处死大鼠,对比两组大鼠肝癌结节数以及肝癌组织中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的表达情况。结果诱导第8天,CD1a、CD80、CD83、CD86及HLA-DR免疫表型达到表达高峰;诱导后DC细胞与T淋巴细胞共培养后,CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);注射DC疫苗后,荷瘤大鼠肝内癌结节数显著降低(P<0.05),肝癌组织中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表达显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用Gm-CSF联合IL-4可以成功诱导DC细胞,体外培养能降低CD4+CD25+Foxp3+Treg表达量,制备成DC疫苗可以降低大鼠肝癌微环境中Treg表达量,对癌结节有显著治疗作用。