Ag85A真核表达重组体的构建及稳定转染细胞系的建立

来源 :微生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hydhyd112

【摘要】

：

构建结核杆菌抗原85A（AgS5A）的真核表达重组体，转染L929细胞，建立稳定转染细胞系。从质粒V1 Jns．tPA—Ag85A中经PCR扩增出Ag85A基因，利用DNA重组技术将其插入到真核表达载体peDNA3．1

【作者】

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刘滢张佩冯永辉王大南徐佳吕昌龙

【机构】

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中国医科大学基础医学院免疫学教研室

【出处】

：

微生物学杂志

【发表日期】

：

2009年1期

【关键词】

：

AG85A 真核表达载体转染 Ag85A eukaryotic expression plasmid transfection

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构建结核杆菌抗原85A（AgS5A）的真核表达重组体，转染L929细胞，建立稳定转染细胞系。从质粒V1 Jns．tPA—Ag85A中经PCR扩增出Ag85A基因，利用DNA重组技术将其插入到真核表达载体peDNA3．1／myc—HisA中，经酶切和测序鉴定后，脂质体转染法转染L929细胞，通过G418选择培养，建立稳定转染细胞系，Western Blot检测Ag85A的表达。成功构建pcDNA3．1／mye—HisA—Ag85A真核表达载体并稳定转染L929细胞，成功表达了目的基因。为进一步研究Ag85A

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