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目的 构建1．3拷贝乙型肝炎病毒（HBV）拉米夫定耐药株的重组逆转录病毒载体及其包装细胞系。方法在野毒株1．3拷贝HBV载体的基础上采用定点突变的方法将rtLl80M，rtM204V位点突变，构建拉米夫定耐药病毒株，并通过PCR、限制性内切酶酶切，分别以正向和反向将野毒株和耐药株分别连接于逆转录病毒载体pLNCX2的相应酶切位点，构建成重组逆转录病毒载体，经双酶切及PCR扩增鉴定。重组载体转染包装细胞，筛选培养细胞克隆并进行病毒滴定。结果通过双酶切、PCR扩增、测序鉴定证实成功构建了1．3拷贝HBV拉米夫