金葡菌P—V杀白细胞毒素的原核表达及对人多形核白细胞的杀伤效应

来源 :中国病理生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gxx756_3476
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目的:通过基因工程方法获得重组的杀白细胞毒素,为深入研究其致病机制打下基础。方法:利用PCR方法从产杀白细胞毒素金葡菌临床分离株的基因组DNA中克隆PVL—S和PVL—F基因序列,分别将其克隆到载体pET22b中,构建重组pET22b—LuKS和pET22b—LuKF原核表达载体,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,异丙基硫代β—D半乳糖苷(sopropyl—beta—D—thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达,将其可溶性表达经镍离子螯合亲和层析纯化后,通过对外周血粒细
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