应用亲和层析分离纯化人小脑乙酰胆碱酯酶的初步研究

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目的分离纯化人小脑乙酰胆碱酯酶(AChE)。材料和方法采用ConA和民B10亲和层析法纯化人小脑AChE。以纯化的人小脑AChE为免疫原,免疫6只BALB/c小鼠制备小鼠抗人小脑AChE抗血清,并检测其与电鳐AChE和人红细胞膜AChE。E的交叉免疫反应性。结果SDS-PAGE还原状态下呈一条主带,相对分子质量为67000,比活性为373U/mg。结论免疫亲和层析法操作简单,可快速纯化人小脑AChE。 Objective To isolate and purify human cerebellum acetylcholinesterase (AChE). Materials and Methods Human AChE was purified by ConA and B10 affinity chromatography. Purified human cerebellum AChE was used as an immunogen to immunize 6 BALB / c mice to prepare mouse anti-human cerebellum AChE antiserum, and to detect AChE and AChE of human erythrocyte membrane. E cross-reactivity. Results The SDS-PAGE showed a main band with a molecular weight of 67000 and a specific activity of 373U / mg. Conclusion Immunoaffinity chromatography is simple in operation and can rapidly purify human cerebellum AChE.
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