【摘 要】
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为进一步研究太平洋鳕Gadus macrocephalus抗冻蛋白AFP4的功能,通过RT-PCR方法克隆得到太平洋鳕4型抗冻蛋白基因（AFP4）的开放阅读框（open reading frame,ORF）,构建原核表达载体并
【机 构】
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大连海洋大学农业部北方海水增养殖重点实验室
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为进一步研究太平洋鳕Gadus macrocephalus抗冻蛋白AFP4的功能,通过RT-PCR方法克隆得到太平洋鳕4型抗冻蛋白基因（AFP4）的开放阅读框（open reading frame,ORF）,构建原核表达载体并优化表达条件,利用纯化的重组蛋白制备多克隆抗体,采用间接ELISA法检测抗体的效价,用Western-blot法分析重组蛋白的免疫原性。结果表明：AFP4基因编码区长度为375 bp,编码125个氨基酸;将AFP4基因的ORF与载体pET-32a连接,构建重组体pET-32a-AFP
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