粉尘螨铁蛋白的克隆、表达及蛋白特征分析

来源 :中国人兽共患病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:doraemon1226
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目的为了获得粉尘螨铁蛋白(ferritin)蛋白,并对该蛋白特征进行分析。方法根据铁蛋白基因已知序列,设计出相应的引物,提取粉尘螨总RNA,采用RT—PCR方法扩增出铁蛋白基因,PCR产物克隆入pET32a载体,构建的重组质粒pET32a—ferritin,经酶切和测序鉴定后,再转化至大肠杆菌BL21(DE3),异丙基-β—D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)鉴定其表达效果,用Ni+离子亲和层析柱纯化其重组蛋白。用生物信息学方法对粉尘螨铁蛋白的特征
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