克雷伯氏菌1，3-丙二醇氧化还原酶基因在大肠杆菌中的克隆与表达

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【摘要】

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以基因组DNA为模板,利用PCR技术从克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)中扩增得到含有1,3-丙二醇氧化还原酶基因(dhaT)的DNA片段,将其定向连接到克隆质粒pGEM-3zf上,得到重组

【作者】

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周文广黄日波

【机构】

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广西大学生命科学与技术学院

【出处】

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广西农业生物科学

【发表日期】

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2004年2期

【关键词】

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克雷伯氏菌 1 3-丙二醇氧化还原酶大肠杆菌克隆表达 Klebsiella pneumoniae 1 3-propanediol oxidoreduct

【基金项目】

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国家高技术研究发展计划(863计划)

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以基因组DNA为模板,利用PCR技术从克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)中扩增得到含有1,3-丙二醇氧化还原酶基因(dhaT)的DNA片段,将其定向连接到克隆质粒pGEM-3zf上,得到重组质粒pGEM-dhaT.将此重组质粒转化到受体菌Escherichia coli DH5α中,通过蓝白斑鉴定挑选出阳性菌株.DNA序列分析表明其基因全长为1 185 bp.将该片段插入表达载体pSE380,构建成重组子pSE-dhaT,并在E.coli JM109中获得表达,经SDS-PAGE检测

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