酪酸对大鼠成骨细胞系中骨唾液酸蛋白转录的作用

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目的:研究酪酸调节大鼠成骨细胞系( ROS17/2.8)中骨唾液酸蛋白( BSP )转录的作用机制。方法使用能生成BSP的大鼠成骨细胞系(ROS17/2.8),分为试验组和对照组。试验组首先加入无血清α-基本必须培养基(α-MEM)配制的(10-8~10-2)mol/L浓度梯度的酪酸12 h,确定最优刺激浓度为10-4 mol/L,然后使用10-4 mol/L的酪酸作用于ROS17/2.8细胞3、6、12 h,对照组加入等量不含酪酸的无血清α-MEM。用Northern杂交试验检测BSP mRNA的表达;用瞬时转染方法检测BSP启动子的转录活性变化;用凝胶迁移实验验证酪酸对核蛋白与相关基因区段结合的作用。结果酪酸作用ROS17/2.8细胞12 h后BSP mRNA的表达水平升高。酪酸对BSP基因启动子转录活性的上调作用主要通过启动子pLUC3(-116~+60)中的纤维母细胞生长因子2响应区段( FRE),在凝胶迁移试验中,酪酸促进了FRE片段与相应核蛋白的结合。结论酪酸通过BSP启动子中的FRE片段增强BSP基因的转录,从而在成骨早期增强成骨细胞活性。
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