幽门螺杆菌CagA蛋白肽段的基因克隆、表达及抗原性检测

来源 :福建医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：abaccj

【摘要】

：

目的克隆幽门螺杆菌CagA蛋白肽段的基因,确定CagA蛋白与相应抗体亲和力最强的肽段. 方法根据幽门螺杆菌cagA全基因序列以DNAMAN软件设计5对引物,采用PCR方法扩增出5条幽门螺

【作者】

：

黄琛佘菲菲陈月秀

【机构】

：

福建医科大学

【出处】

：

福建医科大学学报

【发表日期】

：

2003年1期

【关键词】

：

幽门螺杆菌细菌蛋白质类克隆分子抗原细菌基因表达 Helicobacter pylori bacterioproteins cloning molec

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目的克隆幽门螺杆菌CagA蛋白肽段的基因,确定CagA蛋白与相应抗体亲和力最强的肽段. 方法根据幽门螺杆菌cagA全基因序列以DNAMAN软件设计5对引物,采用PCR方法扩增出5条幽门螺杆菌cagA基因片段.将PCR扩增产物插入原核表达载体pGEX-3X并转化至大肠杆菌Top10中,形成5种重组质粒.经PCR、双酶切和测序鉴定后,以异丙硫半乳糖苷(IPTG)诱导其表达CagA蛋白肽段.包涵体经8 mol/L尿素初步纯化后,运用ELISA方法检测其抗原性并确定相应抗体亲和力最强的CagA蛋白肽段. 结果 5

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