定量检测CCL20的竞争性内参照RT-PCR的建立及其初步应用

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【摘要】

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目的建立检测趋化因子CC亚家族配体20(CCL20)表达水平的内参照定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法.方法将人CCL20编码基因克隆到pbs-△ANK质粒中(PAL-2),将-42 bp的外源核苷

【作者】

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叶巍邵先安郑秀娟陈习武储以微熊思东

【机构】

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复旦大学上海医学院免疫学系-教育部分子医学重点实验室-上海基因免疫与疫苗研究中心

【出处】

：

复旦学报：医学版

【发表日期】

：

2005年3期

【关键词】

：

趋化因子CC亚家族配体20 内参照定量竞争逆转录聚合酶链反应 chemikine CC subtype ligand 20 internal s tand

【基金项目】

：

国家自然科学基金，国家自然科学基金，教育部科学技术研究项目

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目的建立检测趋化因子CC亚家族配体20(CCL20)表达水平的内参照定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法.方法将人CCL20编码基因克隆到pbs-△ANK质粒中(PAL-2),将-42 bp的外源核苷酸片断插入到上述重组质粒的CCL20中间,构建内参照质粒PAL-2-IS.在该定量系统中以PAL-2-IS和PAL-2为模板,用CCL20的特异性引物扩增,根据扩增出的两个不同大小的条带的光密度扫描值对CCL20进行相对定量.结果将PAL-2与已知不同系列浓度的PAL-2-IS以内参照竞争定量RT-PC

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