RNA干扰沉默血管紧张素转化酶调节血管紧张素2-血管紧张素1-7肽-胞外信号调节激酶轴改善人脐静脉内皮细胞功能

来源 :华南国防医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ahdx2009
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目的观察RNA干扰沉默原代培养人脐静脉内皮细胞的血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)对ACE2-血管紧张素1-7肽(angiotensin 1-7,Ang1-7)-胞外信号调节激酶(extracellular regulated kinase,ERK)轴表达和内皮素-1(endothelin-1,ET-1)/一氧化氮(nitric oxide,NO)表达的影响,探讨RNA干扰改善内皮细胞功能的机制。方法培养原代人脐静脉内皮细胞,脂质体转染化学合成的ACE-siRNA入内皮细胞,观察其对ACE mRNA和蛋白表达的影响。内皮细胞分为对照组,AngⅡ刺激组(AngⅡ组)及AngⅡ刺激联合ACE-siRNA转染组(AngⅡ+siRNA组),半定量逆转录RCR法检测各组ACE mRNA表达变化,Western blot法检测各组ACE、ACE2、ERK蛋白表达的变化;酶联免疫法检测各组ET-1、Ang1-7表达水平;酶反应法检测各组NO表达水平。结果作用于ACE mRNA序列3261-3279位点的ACE-siRNA能在转染后48 h有效抑制ACE mRNA和蛋白表达。和AngⅡ组对比,AngⅡ+siRNA组ACE2、Ang1-7、ERK蛋白和ET-1表达明显增加(P<0.05),NO表达下调(P<0.05);ACE siRNA转染入内皮细胞后,ACE2、Ang1-7、ERK蛋白表达进一步增加(P<0.05),由AngⅡ诱导的ET-1释放减少(P<0.05),内皮细胞NO水平升高(P<0.05)。结论特异性ACE-siRNA对ACE表达有沉默效应,它能进一步调整ACE2表达,并通过激活Ang1-7-ERK轴改善内皮细胞功能。
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