单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D基因的原核表达及鉴定

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[目的]构建单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)糖蛋白D原核表达载体并鉴定其表达产物。[方法]用PCR方法特异性扩增HSV-2糖蛋白D基因片断,经双酶切后将其克隆到融合蛋白原核表达载体pGEX-1λT中。将重组表达载体转化大肠杆菌后进行诱导表达,表达产物进行Western-blot鉴定。[结果]重组表达载体诱导表达产物用SDS-PAGE证明含有相对分子质量(Mr)约60kD的糖蛋白D/GST融合蛋白。Western-blot分析证实纯化之后表达产物在相对分子量为60kD处有明显的阳性杂交带。[结论]重组原核表达载体诱导表达出的HSV-2糖蛋白D具有较好的抗原性,为以后的HSV-2糖蛋白D基因工程亚单位疫苗研究打下了基础。
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