采用五倍子提取物为原料,建立了一种同时快速准确分析五倍子提取物中没食子酸和鞣花酸含量的方法;通过全波长扫描确定检测波长、考察各因素对检测结果的影响,确定最佳检测条件,从方法学角度考察检测方法的可行性。采用C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈和1%冰乙酸,梯度洗脱(0→10min:18%乙腈,10→15min:18%→20%乙腈),柱温35℃,检测波长为248nm,洗脱流速为1mL/min,没食子酸和鞣花酸分别在0.44μg～1mg、0.08～8μg内与峰面积呈现良好的线性关系,R2值均为0.9995,平均回收率分别为96.74%、97.10%,相对标准差分别为0.89%、1.53%。应用此方法能够在15min内同时快速准确分析五倍子提取物中的没食子酸和鞣花酸含量,缩短了五倍子的高值化利用研究过程中的检测时间,提高了工作效率。