【摘 要】
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【目的】研究体外培养的大鼠皮层神经元氧糖剥夺(OGD)处理后,Sema3A、Nrp-1mRNA的表达变化及其与神经元轴突网络损伤的关系。【方法】体外培养新生SD大鼠皮层神经元,随机分为
【机 构】
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中山大学医学院附属第一医院神经科,佛山市南海区人民医院ICU
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【目的】研究体外培养的大鼠皮层神经元氧糖剥夺(OGD)处理后,Sema3A、Nrp-1mRNA的表达变化及其与神经元轴突网络损伤的关系。【方法】体外培养新生SD大鼠皮层神经元,随机分为正常对照组和OGD处理组:噻唑蓝(MTT)比色法测定神经元活性;βⅢ-tubulin免疫荧光染色观察轴突网络形态学变化,Real-timePCR检测Sema3A及其受体Nrp-1mRNA的表达;βⅢ-tubulin免疫荧光染色观察外源性Sema3A蛋白对神经元轴突生长的影响。【结果】随着OGD时间的延长,神经元活性呈梯度下降(P<0.01);OGD处理4h可导致神经元轴突网络发生明显的崩解损伤;OGD处理4h、6h后,Sema3AmRNA表达水平显著上调(P<0.01);OGD处理6h后,Nrp-1mRNA表达水平显著上调(P<0.01);经外源性Sema3A(5mg/mL)蛋白处理,可观察到神经元的轴突生长及延伸受到明显抑制(P<0.01)。【结论】OGD处理可诱导Sema3A、Nrp-1mRNA表达上调,并且外源性Sema3A蛋白可在体外抑制轴突生长,提示Sema3A/Nrp-1可能参与OGD处理后轴突网络崩解、细胞凋亡等病理生理过程。
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