Sedlin突变体的表达及其与RB1在细胞中的共定位

来源 :安徽医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lunlunyy

【摘要】

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目的构建脊椎骨骺发育不良蛋白(Sedlin)的缺失突变和点突变体质粒,检测其在细胞内的表达、定位及其与RB1蛋白的共定位情况,为后续研究蛋白质相互作用提供依据。方法以Sedlin

【作者】

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何叶潘林鑫张永范礼斌刘晓颖

【机构】

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安徽医科大学生命科学学院生物学系

【出处】

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安徽医科大学学报

【发表日期】

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2019年10期

【关键词】

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突变体质粒构建蛋白表达免疫荧光 sedlin mutants plasmids construction protein expression immun

【基金项目】

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国家自然科学基金(编号:81772908、81201368),安徽高校自然科学研究项目(编号:KJ2017A203)

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目的构建脊椎骨骺发育不良蛋白(Sedlin)的缺失突变和点突变体质粒,检测其在细胞内的表达、定位及其与RB1蛋白的共定位情况,为后续研究蛋白质相互作用提供依据。方法以Sedlin全长cDNA序列为模板,扩增目的基因序列,连接至表达载体,构建3个原核表达质粒,即pGEX-3X-SedlinN/Y115A/Y115F和相应的真核表达质粒,即pCDGFP-SedlinN/Y115A/Y115F。分别转化pGEX-3X-SedlinN/Y115A/Y115F到大肠杆菌BL21感受态细胞中,IPTG诱导表达、谷胱甘

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