小鼠HAX-1基因重组腺病毒载体的构建表达和鉴定

来源 :免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：bobby_hong

【摘要】

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目的构建小鼠Hax-1基因的重组腺病毒载体，以期进一步进行系统性红斑狼疮模型BXSB小鼠的体内实验研究。方法用RT-PCR方法扩增小鼠全长Hax-1基因，经T／A克隆后，亚克隆至穿梭质粒pAdt

【作者】

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翟志芳郝飞刘志君钟白玉王鹰

【机构】

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第三军医大学西南医院皮肤科,第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤实验室

【出处】

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免疫学杂志

【发表日期】

：

2006年6期

【关键词】

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Hax-1 腺病毒细胞凋亡 HSl-associated protein X-1 Adenovirus Apoptosis

【基金项目】

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国家自然科学基金资助项目（30671886）

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目的构建小鼠Hax-1基因的重组腺病毒载体，以期进一步进行系统性红斑狼疮模型BXSB小鼠的体内实验研究。方法用RT-PCR方法扩增小鼠全长Hax-1基因，经T／A克隆后，亚克隆至穿梭质粒pAdtrack-CMV上，在BJ5183细菌中和AdEasv-1进行同源重组，筛选阳性克隆，酶切、测序鉴定正确后，脂质体法转染AD-293细胞进行包装，扩增，氯化铯密度梯度离心纯化病毒并检测其滴度。RT-PCR鉴定重组腺病毒转染AD-293细胞后Hax-1的表达，同时进行野生型腺病毒的检测。结果经酶切及测序证实Hax-1

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