长链非编码RNA结直肠肿瘤差异表达基因靶向微小RNA-384对肺癌SPC-A1细胞侵袭和迁移的影响

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lkjh321
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目的

观察长链非编码RNA(lncRNA)结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE)靶向微小RNA(miRNA,miR)-384对人肺腺癌细胞株SPC-A1细胞侵袭和迁移的影响。

方法

在肺癌SPC-A1细胞中转染小干扰RNA(siRNA) CRNDE,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)测定干扰效果,噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖变化,Transwell小室测定细胞侵袭和迁移,蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)蛋白表达水平,靶向关系预测软件预测CRNDE与miR-384有结合位点,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。在SPC-A1细胞中共转染siRNA CRNDE和miR-384抑制物(Inhibitors),用上述方法测定miR-384 Inhibitors对siRNA CRNDE影响肺癌SPC-A1细胞侵袭和迁移的逆转作用。两组间比较采用t检验,多组差异比较采用单因素方差分析。

结果

转染siRNA CRNDE后的肺癌SPC-A1细胞中CRNDE表达水平降低(1.01±0.12比0.43±0.06),细胞增殖能力降低(0.37±0.05比0.24±0.02,F=10.467,P<0.05),细胞侵袭(141.25±15.23比101.02±9.84,F=9.420,P<0.05)和迁移(188.20±16.84比142.58±11.22,F=8.345,P<0.05)数目减少,细胞中MMP-9、MMP-2、Vimentin蛋白水平下降,E-cadherin蛋白水平升高。CRNDE与miR-384有互补结合位点,CRNDE靶向负调控miR-384表达。miR-384 Inhibitors可以逆转siRNA CRNDE对肺癌细胞增殖(0.26±0.03比0.35±0.04,t=3.118,P<0.05)、迁移(139.84±10.57比176.51±12.45,t=5.276,P<0.05)、侵袭(99.84±10.02比134.25±11.25,t=3.890,P<0.05)能力抑制作用和MMP-9、MMP-2、E-cadherin、Vimentin蛋白表达影响。

结论

下调lncRNA CRNDE靶向miR-384抑制肺癌SPC-A1细胞侵袭和迁移。

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