【摘 要】
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目的 观察高血糖对培养的人肾小球系膜细胞(HMC)中NLRP3炎症小体表达的影响,并探讨硫辛酸(LA)对上述过程的干预机制,以探寻糖尿病肾病(DN)发病新机制和防治新策略.方法 传代培养人HMC,根据不同的干预因素分为正常对照(NG)组、高糖(HG)组、LA组、HG+LA组.采用CCK-8方法分别检测不同浓度的LA对HMC活性的影响,流式细胞仪检测活性氧(ROS)水平,RT-PCR检测NLRP3炎症小体mRNA的表达,Western-blot检测LA对HMC中NLRP3炎症小体的蛋白表达的影响.结果 CC
【机 构】
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菏泽医学专科学校内科教研室,山东菏泽 274000;菏泽医学专科学校附属医院内分泌科,山东菏泽 274000
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目的 观察高血糖对培养的人肾小球系膜细胞(HMC)中NLRP3炎症小体表达的影响,并探讨硫辛酸(LA)对上述过程的干预机制,以探寻糖尿病肾病(DN)发病新机制和防治新策略.方法 传代培养人HMC,根据不同的干预因素分为正常对照(NG)组、高糖(HG)组、LA组、HG+LA组.采用CCK-8方法分别检测不同浓度的LA对HMC活性的影响,流式细胞仪检测活性氧(ROS)水平,RT-PCR检测NLRP3炎症小体mRNA的表达,Western-blot检测LA对HMC中NLRP3炎症小体的蛋白表达的影响.结果 CCK-8结果显示,LA的最佳保护浓度为200 μmol/l;流式细胞仪检测结果显示,HG组ROS表达水平高于NG组,差异有统计学意义(P＜0.05).RT-PCR及Western-blot 检测结果显示,HG组NLRP3炎症小体表达高于NG组,差异有统计学意义(P＜0.05);加入LA后,NLRP3炎症小体的表达均下降,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 高糖环境可促进人HMC的增殖,在一定浓度范围内,适当浓度的LA能抑制HMC的增殖;高血糖可通过氧化应激途径增加NLRP3炎症小体的表达,影响DN的发生发展,而LA对以上过程具有抑制作用.
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