安氏隐孢子虫肌动蛋白部分编码基因真核表达载体的构建

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[目的]将安氏隐孢子虫肌动蛋白基因进行克隆并在Hela细胞中真核表达.[方法]根据筛选安氏隐孢子虫T7噬菌体展示文库获得的肌动蛋白(CA42)部分编码基因序列设计特异性引物,扩增目的基因CA42,构建重组真核表达载体pVAXl-CA42,将其转化入Hela细胞,用间接免疫荧光、SDS-PAGE、Western blotting检测CA42蛋白在转染细胞中的表达情况.[结果]重组质粒能在Hela细胞中表达,且表达产物具有反应原性.[结论]成功克隆并表达了安氏隐孢子虫肌动蛋白基因,并在Hela细胞中能够稳定表达.
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