【摘 要】
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为了研究并优化不同启动子和质粒类型对酵母细胞青蒿二烯产量的影响,对携带游离型质粒的酿酒酵母人工细胞进行了四种启动子替换,对携带整合型质粒和着丝粒型质粒的人工细胞进
【机 构】
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系统生物工程教育部重点实验室天津大学化工学院制药工程系;
【基金项目】
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国家“863”计划资助项目(2012AA02A701)
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为了研究并优化不同启动子和质粒类型对酵母细胞青蒿二烯产量的影响,对携带游离型质粒的酿酒酵母人工细胞进行了四种启动子替换,对携带整合型质粒和着丝粒型质粒的人工细胞进行了强启动子和弱启动子替换。利用GC-TOF/MS检测并比较以上几株人工细胞的发酵产物浓度。结果表明,所构建的人工细胞均能生产青蒿二烯,其中携带着丝粒型质粒的人工细胞SyBE001243（W-tH-20[pRS316/TDH3/ADS]）产量最高,为44.7 mg/L。进一步对比以上结果发现,发酵液中青蒿二烯的浓度与启动子的强弱呈正相关;对每种底盘细胞,发酵液中青蒿二烯的浓度与导入的外源模块中质粒类型有关;且对于强启动子,携带不同类型质粒的人工细胞发酵液中青蒿二烯的浓度差异较大,而对于弱启动子,携带不同类型质粒的人工细胞发酵液中青蒿二烯的浓度均较低,浓度差异较小。
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