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目的
探讨高压氧预适应对体外血脑屏障内皮细胞紧密连接的影响及机制。
方法通过hCMEC/D3细胞培养建立体外血脑屏障模型。将培养的hCMEC/D3细胞按数字表法随机分为3组：空白对照组(A组)、缺氧组(B组)及高压氧预处理组(C组)。采用Millicell-ERS系统测定血脑屏障的跨内皮阻抗(TEER)。采用细胞免疫荧光检测内皮细胞紧密连接蛋白oOccludin≹及ZO-1的表达变化。
结果正常培养的hCMEC/D3细胞形态呈梭形，细胞之间紧密结合，TEER值达80～120 Ω·cm2，提示成功建立体外血脑屏障。相对于A组[(107.17±10.41)Ω·cm2]，B、C两组TEER值[(50.02±6.87)Ω·cm2、(83.81±8.22)Ω·cm2]均有所下降，但B组下降更明显。免疫荧光结果显示：相对于A组，B组Occludin的表达水平明显降低，而C组无明显变化。相对于A组，B组ZO-1在细胞膜表达明显降低，而胞浆表达增多，而C组ZO-1的表达无明显变化。
结论高压氧预适应可以缓解缺氧时紧密连接蛋白Occludin和ZO-1表达水平及方式的改变。