【摘 要】
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目的 建构对人类表皮生长因子样结构域7（EGFL7）基因真核表达载体以及稳定性转染EA.hy926细胞系的科学评价体系。方法 采用实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）方法获得EGFL7的开放阅读框（ORF），借助双酶切方式，使得EGFL7能够被克隆至真核表达载体（pEGFP-N1）中并获取到已经重组好的质粒pEGFP-N1-EGFL7。在进一步接受测序和鉴定处理后，借助电转仪对EA.hy926细胞
【基金项目】
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广东省自然科学基金项目（编号：2018A0303130288）；
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目的 建构对人类表皮生长因子样结构域7（EGFL7）基因真核表达载体以及稳定性转染EA.hy926细胞系的科学评价体系。方法 采用实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）方法获得EGFL7的开放阅读框（ORF），借助双酶切方式，使得EGFL7能够被克隆至真核表达载体（pEGFP-N1）中并获取到已经重组好的质粒pEGFP-N1-EGFL7。在进一步接受测序和鉴定处理后，借助电转仪对EA.hy926细胞进行转染，然后通过G418筛查进而建构起稳定性转染EA.hy926细胞系。使用实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测EGFL7基因及蛋白在EA.hy926细胞系中的表达。结果 转染EGFL7的EA.hy926细胞的EGFL7基因和蛋白水平均明显高于对照质粒转染组和空白对照组（P＜0.05）。结论 成功建构人EGFL7真核表达载体并鉴定了EGFL7在EA.hy926细胞系中的过表达，为探讨EGFL7对早产儿支气管肺发育不良的影响奠定基础。
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