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目的
在无血清培养液悬浮培养条件下筛选人乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231的干细胞相关亚群,并初步探讨其相关基因的表达差异。
方法采用有血清贴壁和无血清悬浮培养方法,扩增出贴壁细胞和悬浮微球体细胞两种肿瘤细胞。采用流式细胞术检测MCF-7、MDA-MB-231贴壁及悬浮微球体细胞中CD44+ CD24-、CD133+表型细胞比例的变化。反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组贴壁及悬浮微球体细胞中CD44、CD24、CD133、ALDH3A1、ABCG2、CXCR4基因的表达变化。
结果MCF-7微球体细胞的CD44+ CD24-/low细胞比例高于其贴壁培养细胞(P<0.05);CD133+细胞比例同其贴壁培养细胞差异无统计学意义(P>0.05)。MDA-MB-231微球体细胞的CD44+ CD24-/low细胞比例低于其贴壁培养细胞(P<0.05);CD133+细胞比例高于其贴壁培养细胞(P<0.05)。MCF-7微球体细胞中CD44、ABCG2的表达较其贴壁细胞上调(均P<0.05),CD24、CD133、ALDH3A1、CXCR4表达与其贴壁细胞相比,差异均无统计学意义(均P>0.05)。MDA-MB-231微球体细胞中CD24、CD133、ABCG2、ALDH3A1、CXCR4表达较其贴壁细胞上调(均P<0.05),CD44表达下调(P<0.05)。MCF-7和MDA-MB-231微球体细胞中CD44、CD24、CD133、ALDH3A1表达差异有统计学意义(均P<0.05)。
结论乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞系微球体中乳腺癌干细胞相关基因的表达存在差异,提示不同分子亚型乳腺癌干细胞的来源可能不同。