【摘 要】
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目的 初步建立提取纯化结核分枝杆菌(M.TB)脂阿拉伯甘露聚糖(lipoarabinomanan,LAM)的方法,并将其用于血清标本检测,评价其对肺结核的诊断价值.方法 M.TB菌体经冰浴超声破碎,
【机 构】
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同济大学附属上海市肺科医院/上海市结核(肺)重点实验室
【基金项目】
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国家十一五科技重大专项;上海市卫生局青年基金
论文部分内容阅读
目的 初步建立提取纯化结核分枝杆菌(M.TB)脂阿拉伯甘露聚糖(lipoarabinomanan,LAM)的方法,并将其用于血清标本检测,评价其对肺结核的诊断价值.方法 M.TB菌体经冰浴超声破碎,乙醇回流,DNase I酶RNase酶除去DNA和RNA,热酚水法去蛋白,氯仿甲醇去酚和脂质,得到粗制的脂多糖.经Sephacryl-100凝胶过滤层析分离纯化,得到LAM.将其作为抗原,通过免疫金渗滤法检测涂阳肺结核和对照血清标本中的LAM抗体.结果 所得LAM经SDS-PAGE银染,与对照标准品大小一致,为37kDa.血清LAM抗体检测对肺结核诊断的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、和涂片符合率分别为91.7%、87.8%、92.7%、86.2%、90.2%.结论 成功提取到LAM抗原,用其检测血清结核抗体显示出理想的敏感性和特异性,有望成为结核病血清学快速诊断方法之一.
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