肝癌和慢性肝炎患者丙型肝炎病毒核心蛋白基因表达及其核苷酸序列分析

来源 :中华消化杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xianglongke2000
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目的:为探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染在肝癌发生中的作用。方法:从HCV第二代抗体阳性的肝癌和慢性肝炎患者血清中提取HCV-RNA,经随机引物逆转录合成cDNA,再以病毒5’-末端至E1区间的多对引物进行巢式PCR扩增,其最终产物(425bp和621bp)分别连接p-GEM-T载体,在大肠杆菌中表达后进行测序。结果:所有患者均为HCV-Ⅱ型感染,完整的核心蛋白基因(573bp)与已报道的其它株比较,其核苷酸同源性为:慢性肝炎株89.0%~95.5%,肝癌株88.7%~92.3%;氨基酸同源性为:前者91.1%~96.6%,后者87.4%~92.1%。且发现该段基因中核苷酸置换肝癌患者较明显地高于慢性肝炎患者。结论:本文资料提示核心蛋白基因的变异,可能与HCV的慢性持续感染及肝癌的发生有关。 Objective: To investigate the role of hepatitis C virus (HCV) infection in the development of hepatocellular carcinoma. METHODS: HCV-RNA was extracted from the serum of HCV second-antibody positive liver cancer patients and chronic hepatitis patients. cDNA was reverse transcribed by random primers and nested PCR amplification was performed using multiple pairs of primers from the 5′-end to the E1 interval of the virus. The final products (425 bp and 621 bp) were respectively ligated into the p-GEM-T vector and expressed in E. coli and then sequenced. Results: All patients were infected with HCV-II, and the complete core protein gene (573 bp) was compared with other reported strains. The nucleotide homology was: chronic hepatitis strains 89.0%-95.5%, liver cancer strains 88.7% to 92.3%; the amino acid homology was 91.1% to 96.6% in the former and 87.4% to 92.1% in the latter. It was found that the patients with nucleotide replacement liver cancer in this segment of the gene were significantly higher than those with chronic hepatitis. Conclusion: The data in this paper suggest that the variation of the core protein gene may be related to the chronic persistent infection of HCV and the occurrence of liver cancer.
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