白念珠菌天冬氨酸蛋白酶基因SAP2在大肠杆菌中的表达及产物纯化

来源 :中国真菌学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huangwj03
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目的构建SAP2重组原核表达载体并表达、纯化出可溶性的蛋白,为抗体制备及sap2抗原检测奠定基础。方法提取白念珠菌基因组DNA为模板,经PCR方法获取SAP2目的基因。双酶切SAP2基因与原核表达载体pMAL-c2x(+),连接酶切产物,转化大肠杆菌TOP10感受态细菌,筛选菌落和测序鉴定。将pMAL-c2x/SAP2重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经异丙基硫代-β—D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达出可溶性的融合蛋白,经直链淀粉树脂亲和层析、蛋白酶FactorXa切割标签获得纯化的Sap
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