利用环介导等温扩增技术快速检测食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌

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目的:将一种新颖的核酸扩增技术一环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)应用于小肠结肠炎耶尔森氏菌的快速检测.方法:针对小肠结肠炎耶尔森氏菌毒素基因yrul/yruR设计5条特异性引物(两条内引物、两条外引物和一条环引物),建立了小肠结肠炎耶尔森氏菌LAMP检测方法.结果:对8种相关肠道细菌进行LAMP扩增,仅小肠结肠炎耶尔森氏菌得到阳性扩增结果,证明引物具有很高的特异性.小肠结肠炎耶尔森氏菌基因组DNA和纯培养物的检测灵敏度分别约为74 fg和43 cfu/ml.对模拟食品样品进行直接检测,检测限为76 cfu/g.结论:该方法检测小肠结肠炎耶尔森氏菌特异性强、灵敏度高,并且操作简便、检测成本低,1小时即可完成,有望发展成为快速检测小肠结肠炎耶尔森氏菌的有效手段.
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