光皮树ISSR—PCR扩增条件和反应体系优化

来源 :湖南林业科技 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ynsyxs

【摘要】

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以光皮树基因组DNA为材料，采用单因素实验，测试了退火温度、模板用量、dNTP浓度、Taq酶用量、Primer浓度、Buffer用量和Mg^2＋浓度等因素对ISSR-PCR的影响。优化的反应体系和条件

【作者】

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李培旺李昌珠饶力群张良波肖志红

【机构】

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湖南省林业科学院,湖南农业大学

【出处】

：

湖南林业科技

【发表日期】

：

2008年4期

【关键词】

：

光皮树 ISSR 种质资源基因定位 Swida wilsoniana ISSR germpiasm gene localization

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以光皮树基因组DNA为材料，采用单因素实验，测试了退火温度、模板用量、dNTP浓度、Taq酶用量、Primer浓度、Buffer用量和Mg^2＋浓度等因素对ISSR-PCR的影响。优化的反应体系和条件：总体系为25μL，引物0．2μmol／L、模板20ng、Mg^2＋ 2．5mmol／L、Taq酶0．5U、dNTP为0.1mmol／L和Buffer为2.5μL。扩增程序：94℃预变性5min，1个循环；94℃变性50s，52℃退火1min，72℃延伸1．5min，40个循环；72℃后延伸10min，1个循

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