豆芽吡哆胺-丙酮酸转氨酶的分离纯化及部分酶学性质

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通过2次硫酸铵分段沉淀、2次SephadexG-100凝胶过滤柱层析、2次DEAE—SepharoseFastFlow阴离子交换柱层析,对新鲜豆芽中的毗哆胺-丙酮酸转氨酶进行分离纯化,经SDS—PAGE电泳检测,样品达到电泳级纯。结果显示:该酶被纯化了207.56倍,得率为7.84%,最适反应温度为50℃,最适反应pH值为9.0,酶的温度稳定范围为0—50℃,pH值稳定范围为7.0~9.0。在最适反应条件下,以吡哆胺和丙酮酸为反应底物时测得酶的K分别为1.7765、5.3555mmol/L。
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