【摘 要】
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目的 研究鼠尾草酸(CA)对人黑素瘤A375细胞增殖的影响并初步探讨其作用机制,为寻找新的黑素瘤临床治疗药物奠定一定的理论基础.方法 A375细胞传代培养后分为正常组、10μmol/
【机 构】
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南阳市中心医院皮肤科,河南南阳,473000;南阳市中心医院普外科,河南南阳,473000;郑州大学第一附属医院皮肤科,河南郑州,450052
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目的 研究鼠尾草酸(CA)对人黑素瘤A375细胞增殖的影响并初步探讨其作用机制,为寻找新的黑素瘤临床治疗药物奠定一定的理论基础.方法 A375细胞传代培养后分为正常组、10μmol/L CA组(10μmol/L CA处理24h)、20 μmol/L CA组、50μmol/L CA组,FH535(β-catenin抑制剂)组(20 μmol/L FH535处理24h).MTT法检测细胞抑制情况;平板细胞克隆形成实验检测克隆形成情况;流式细胞仪检测细胞周期以及细胞凋亡变化;RT-PCR法检测A375细胞中β-catenin、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、淋巴增强因子1(LEF1)、原癌基因(C-myc) mRNA的表达;Western blot检测A375细胞中β-catenin、CyclinD1、LEF1、C-myc蛋白表达.结果 与正常组相比,CA各组、FH535组细胞抑制率增加,CA各组呈时间、剂量依赖性增加(P＜0.05);CA各组、FH535组克隆形成数量均降低,CA各组克隆形成数量呈剂量依赖性降低(P＜0.05).流式细胞仪检测显示与正常组相比,CA各组、FH535组G1期细胞比例升高,S期细胞比例降低,CA各组G1期细胞比例呈剂量依赖性升高,S期细胞比例呈剂量依赖性降低(P＜0.05);CA各组、FH535组细胞凋亡率升高,CA各组凋亡率呈剂量依赖性升高(P＜0.05).与正常组相比,CA各组、FH535组β-catenin、CyclinD1、LEF1、C-myc mRNA、蛋白表达降低,CA各组呈剂量依赖性降低(P＜0.05).结论 CA可能通过抑制β-catenin的表达,引起细胞周期G1期阻滞,进而抑制人黑素瘤A375细胞增殖.
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