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目的
观察藤黄酸对人肝癌细胞株HepG2凋亡和自噬的影响,并探讨其可能机制。
方法不同浓度的藤黄酸处理HepG2细胞24 h后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞增殖率,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用单丹磺酰尸胺(MDC)荧光染色观察细胞内自噬泡的形成,采用Western blot方法检测细胞凋亡相关蛋白Bax、bcl-2及自噬相关蛋白Beclin 1的表达水平。
结果藤黄酸对HepG2细胞生长的抑制作用呈剂量依赖性。0、2.0、4.0、8.0 μmol/L藤黄酸作用24 h后,细胞凋亡率升高,分别为5.31 %、29.18 %、31.50 %、46.09 %(P<0.05);MDC平均荧光强度也升高,分别为6.3±1.1、82.6±4.5、132.9±15.7、157.7±9.0(P<0.01);促凋亡蛋白Bax表达升高,分别为0.17±0.02、0.75±0.06、0.78±0.05、0.89±0.10(P<0.05);抗凋亡蛋白bcl-2表达降低,分别为1.18±0.04、0.90±0.06、0.64±0.08、0.57±0.05(P<0.05);同时自噬相关蛋白Beclin 1的表达升高,分别为0.67±0.03、0.92±0.04、0.95±0.07、1.04±0.06(P<0.05)。
结论藤黄酸通过诱导细胞凋亡与自噬性死亡的方式抑制人肝癌HepG2细胞的生长。