5种温带果树SRAP-PCR退火温度的优化

来源 :基因组学与应用生物学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:software222
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SRAP技术是一种多态性和信息量丰富的新型分子标记技术,近年来在植物遗传多样性分析、种质鉴定、遗传连锁图的构建以及比较基因组学研究等方面得到广泛应用。有关SRAP-PCR反应体系的优化很少涉及到退火温度。因此,我们利用梯度PCR技术,对SRAP-PCR过程中的两步退火温度进行了研究,以期获得较好的退火温度组合。通过对第一步前5轮循环的退火温度梯度37~50℃的实验,其退火温度可提高到41℃;对第二步后30轮循环的退火温度梯度50~60℃的实验,其退火温度可提高到52℃。应用该程序在苹果、桃、板栗、梨和樱桃等5个树种各4个品种进行扩增,均获得了良好的结果。
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