【摘 要】
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为了从酶学实验证实血脂康是羟甲基戊二酸单酰CoA(HMG CoA)还原酶的抑制剂 ,用多次冻融、超离心、硫酸铵分步沉淀及热处理纯化了猪肝HMG CoA还原酶并用分光光度法测其酶活力
【机 构】
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中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院心血管病研究所
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为了从酶学实验证实血脂康是羟甲基戊二酸单酰CoA(HMG CoA)还原酶的抑制剂 ,用多次冻融、超离心、硫酸铵分步沉淀及热处理纯化了猪肝HMG CoA还原酶并用分光光度法测其酶活力和反应速度。从 5 0 0g新鲜猪肝组织得到 116mgHMG CoA还原酶粗制品 ,含 10 4活力单位 ,比活力为 89mU mg蛋白。按米氏方程双倒数作图法求得其对底物HMG CoA的米氏常数即Km 为 74 4 μmol L ,其纯度及活力均达到动力学实验要求。利用该酶制品比较了国产降血脂药血脂康与进口降血脂药洛伐他汀及辛伐他汀对HMG CoA还原酶的抑制动力学性质。实验结果显示 ,血脂康与洛伐他汀、辛伐他汀均为HMG CoA还原酶的竞争性抑制剂 ;抑制作用强弱为血脂康 >辛伐他汀 >洛伐他汀 ;其抑制常数Ki分别为 19 9μg mL、2 4 8μg mL和 4 1 6 μg mL。以上表明 ,血脂康对猪肝HMG CoA还原酶有抑制作用 ,为血脂康降脂疗效提供了科学的实验依据
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