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目的
探讨PCR检测法在腹膜透析相关性腹膜炎(PDAP)细菌检测中的临床应用价值。
方法收集2014年1月至2014年12月安徽医科大学第一附属医院PDAP患者腹膜透出液标本40份,分别行传统细菌培养与PCR法检测致病菌。根据细菌16S rRNA基因设计细菌通用引物,并参考文献设计17种细菌的特异引物。提取腹透液DNA后行实时荧光定量PCR(qPCR)扩增。设立标准菌株DNA提取液为阳性对照,无菌双蒸水作为阴性对照。
结果(1)传统细菌培养法结果阳性26例(26/40),革兰阳性球菌18例(18/26),主要菌种表皮葡萄球菌5例、溶血葡萄球菌4例、大肠杆菌4例、金黄色葡萄球菌3例。(2) PCR检测细菌结果阳性为33例(33/40),主要菌种与普通培养结果无异;阳性标本中有2例未测出具体菌种。(3)以细菌培养作为金标准,PCR检测技术对PDAP致病菌检测的敏感度为96.15%,特异度为42.86%,且检出阳性率明显高于普通培养法,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。(4) PCR法检测致病菌4~6 h内出结果,普通培养平均报告时间为(77.88±15.53) h,明显长于PCR法。
结论与传统细菌培养法比较,PCR检测法具有敏感、简便、快速的优点,在PDAP患者腹透液细菌的检测中具有一定的临床价值。