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目的
观察Toll样受体2和4在新生儿不同感染时的变化,探讨它们在新生儿抗感染免疫中的作用。
方法收集200例不同胎龄(26~43周)新生儿外周血,分为败血症组、细菌性肺炎组、细菌性脑膜炎组、尿路感染组、先天性梅毒组和非感染组。采用荧光定量PCR法测定TLR2和4 mRNA转录水平(与β-actin拷贝数比值),流式细胞仪检测外周血单核细胞表面TLR2和TLR4蛋白表达水平(荧光强度)以及TLR2和TLR4阳性细胞百分比。
结果1. TLR2 mRNA在败血症组明显增加(6.14±0.80),在G+菌败血症组表达最为显著(6.43±0.74),细菌性肺炎组(5.49±0.62)、细菌性脑膜炎组(5.61±0.60)和先天性梅毒组(5.89±0.38)增加也很显著。细胞表面TLR2蛋白表达与mRNA变化一致。2. TLR4 mRNA在G-菌败血症组表达最高(6.78±0.79)。在细菌性肺炎组(5.33±1.07)、细菌性脑膜炎组(5.87±0.70)和尿路感染组(5.38±0.91)也明显增高。TLR4阳性细胞百分比在各感染组显著增加。3.G+菌败血症组TLR2 mRNA显著高于TLR4 mRNA的表达,G-菌败血症组TLR4 mRNA显著高于TLR2 mRNA的表达。TLR2阳性细胞百分比水平各组均明显高于TLR4。
结论新生儿感染时TLR2 mRNA/蛋白和TLR4 mRNA显著增高,特别是在严重感染败血症组。提示TLR2和TLR4信号传导途径参与新生儿抗感染免疫机制,为进一步深入了解新生儿感染免疫机制提供实验基础。