TLR4全长及其截断体重组腺病毒对Rf-6A细胞骨架的影响

来源 :生物物理学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：walker1234

【摘要】

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为了研究LPS受体TLR4全长及其胞内段缺失的TLR4截断体(ΔTLR4)的绿色荧光蛋白重组腺病毒对内皮细胞系Rf-6A骨架蛋白的影响，采用PCR方法扩增目的基因片段，亚克隆至腺病毒穿梭质

【作者】

：

宋革孙学刚姜勇

【机构】

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第一军医大学病理牛理学教研室

【出处】

：

生物物理学报

【发表日期】

：

2004年2期

【关键词】

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腺病毒细胞骨架 TLR4 LPS受体绿色荧光蛋白内皮细胞系Rf-6A 骨架蛋白 PCR 脂多糖 Adenovirus Cytoskeleton Tol

【基金项目】

：

国家杰出青年科学基金项目(39925014),,国家自然科学基金重点项目(39830400),,973计划项目(2002CB513000)

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为了研究LPS受体TLR4全长及其胞内段缺失的TLR4截断体(ΔTLR4)的绿色荧光蛋白重组腺病毒对内皮细胞系Rf-6A骨架蛋白的影响，采用PCR方法扩增目的基因片段，亚克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack中，用BJ5183细菌同源重组法将目的基因重组于腺病毒骨架载体，重组腺病毒质粒经Pac Ⅰ酶切线性化后，用脂质体法转染293细胞进行腺病毒的包装扩增，用重组腺病毒感染Rf-6A细胞，采用免疫荧光标记方法观察结果。免疫荧光标记结果表明Ad-ΔTLR4明显抑制了LPS引起的细胞骨架F-actin的解聚与重排

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