【摘 要】
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目的探究淫羊藿苷对大鼠脂肪干细胞成骨分化的影响。方法分离、培养SPF级SD雌性大鼠脂肪干细胞后,流式细胞术进行表面标志物检测,然后通过茜素红、油红O染色观察脂肪干细胞的成骨分化及成脂分化。将第3代脂肪干细胞分为空白组、白藜芦醇组(100μmol/L)、淫羊藿苷Ⅰ~Ⅳ组(1、10、50、100μmol/L),培养21d后对脂肪干细胞LIM结构域蛋白Ajuba(Ajuba)、Runt相关转录因子2(R
【机 构】
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广州中医药大学惠州医院(惠州市中医医院)
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(No.82174147); 广东省基础与应用基础研究基金(No.2021A1515011271); 广东省中医药局科研项目(No.20213019);
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目的探究淫羊藿苷对大鼠脂肪干细胞成骨分化的影响。方法分离、培养SPF级SD雌性大鼠脂肪干细胞后,流式细胞术进行表面标志物检测,然后通过茜素红、油红O染色观察脂肪干细胞的成骨分化及成脂分化。将第3代脂肪干细胞分为空白组、白藜芦醇组(100μmol/L)、淫羊藿苷Ⅰ~Ⅳ组(1、10、50、100μmol/L),培养21d后对脂肪干细胞LIM结构域蛋白Ajuba(Ajuba)、Runt相关转录因子2(Runx2)、碱性磷酸酶(ALP)进行qRT-PCR、Western-blotting检测。结果培养至第3代的脂肪干细胞表面标记物表现为CD90(95%)、CD34(9.26%)。成骨诱导21d时茜素红染色可见橘红色钙化结节,成脂诱导21d时油红O染色可见红色脂滴。白藜芦醇与100μmol/L淫羊藿苷均能促进脂肪干细胞Runx2、ALP基因及蛋白表达,且与白藜芦醇比较(Runx2:3.017±0.641,ALP:11.803±2.666;Runx2:316.516±39.802,ALP:285.630±41.685),同浓度的淫羊藿苷(Runx2:8.241±0.521,ALP:16.797±5.052;Runx2:596.004±73.736,ALP:494.322±70.520)呈现出显著的促进效应(P<0.01,P<0.05)。白藜芦醇及各浓度淫羊藿苷均可抑制Ajuba基因及蛋白表达,且与100μmol/L白藜芦醇比较(Ajuba:0.422±0.077;Ajuba:0.023±0.003),50μmol/L(0.499±0.158)、100μmol/L(0.479±0.162)淫羊藿苷抑制Ajuba基因表达差异无统计学意义,10μmol/L(0.013±0.003)、50μmol/L(0.004±0.001)、100μmol/L(0.029±0.004)淫羊藿苷抑制Ajuba蛋白表达差异均无统计学意义。结论淫羊藿苷与白藜芦醇均具有促进大鼠脂肪干细胞成骨分化以及抑制其成脂分化的作用,二者抑制成脂分化的效应相当,而淫羊藿苷对成骨分化的促进作用优于同浓度的白藜芦醇。
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