【摘 要】
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为构建拟南芥抗病相关T1 N6_22基因的原核表达载体并进行高效表达,获得纯化的T1 N6_22蛋白,以拟南芥Col-0的cDNA为模板,扩增获得了T1N6_22基因CDS,对其进行克隆、测序后与含有GST标
【机 构】
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河北农业大学、真菌毒素与植物分子病理学实验室,河北北方学院农林科技学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31200203);河北省自然科学基金项目(C2012204032;C2014405010);高等学校博士学科点专项科研基金项目(20121302120007)
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为构建拟南芥抗病相关T1 N6_22基因的原核表达载体并进行高效表达,获得纯化的T1 N6_22蛋白,以拟南芥Col-0的cDNA为模板,扩增获得了T1N6_22基因CDS,对其进行克隆、测序后与含有GST标签蛋白的pGEX4T-1载体相连,构建T1N6_22的原核表达载体pGEX4T-1-T1N6_22-GST。经酶切和测序鉴定正确后,将构建好的载体及空载体转化大肠杆菌BL21。结果表明,在大肠杆菌BL21菌株中成功表达了与标签蛋白融合的T1 N6_22蛋白,大小约57 kDa。 SDS-PAGE分析表
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