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构建siRNA慢病毒载体抑制A549细胞株VEGF受体KDR基因的表达

来源 :临床医学工程 | 被引量 : 0次 | 上传用户：gyzlw21

【摘要】

：

目的构建针对血管内皮生长因子（VEGF）受体KDR基因的siRNA慢病毒载体，鉴定其对肺癌细胞株A549基因干扰效果。方法设计合成针对KDR编码区的三条siRNA序列及阴性对照序列，克隆到PGCL

【作者】

：

王彤李丹妮李咏王杰

【机构】

：

沈阳医学院生物化学教研室

【出处】

：

临床医学工程

【发表日期】

：

2012年10期

【关键词】

：

KDR RNA干扰慢病毒 A549细胞株 KDR RNA interference Lentivirus A549 cell line

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目的构建针对血管内皮生长因子（VEGF）受体KDR基因的siRNA慢病毒载体，鉴定其对肺癌细胞株A549基因干扰效果。方法设计合成针对KDR编码区的三条siRNA序列及阴性对照序列，克隆到PGCL-GFP载体，构建重组质粒，行PCR鉴定、DNA测序分析；转染人肺癌细胞株A549，Real-TimePCR及Westernblot分别检测KDRmRNA、蛋白水平变化；细胞计数法绘制细胞生长曲线，流式细胞仪检测细胞周期。结果成功构建pGCL／KDR-siRNA重组质粒。A549干扰组KDRmRNA表达率下降，K

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