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目的
采用基因转染技术观察USP28不同表达状态对ECA109细胞放射敏感性的影响，为食管癌的综合治疗提供理论依据。
方法qRT-PCR检测USP28和c-Myc在食管上皮细胞Het-1A、食管癌细胞ECA109和放射抗拒细胞ECA109R中的表达。针对USP28基因和c-Myc基因设计特异性siRNA序列，构建pcDNA-USP28和pcDNA-c-Myc质粒，转染食管癌细胞ECA109，观察转染效果及相关蛋白表达情况。6 Gy X射线照射细胞，流式细胞仪检测各组的细胞凋亡情况。克隆形成实验评价放射敏感性。
结果USP28和c-Myc在ECA109中的表达高于正常的食管上皮细胞Het-1A (P<0.05)，在ECA109R中的表达高于ECA109(P<0.05)。成功构建pcDNA-USP28和pcDNA-c-Myc重组质粒，转染结果显示与阴性对照组比较无论mRNA水平和蛋白水平，si-USP28组中USP28的表达明显下降，而在pcDNA-USP28组中USP28的表达明显上升。针对c-Myc的研究得到类似结果。与对照组比较，pcDNA-USP28组c-Myc在蛋白水平表达明显升高，si-USP28中c-Myc表达下降(P<0.05)。6 Gy照射ECA109后pcDNA-USP28组细胞凋亡率下降，放射敏感性下降；ECA109R中si-USP28组是细胞凋亡率增加，放射敏感性增强。
结论USP28的蛋白表达与食管癌细胞的放射敏感性密切相关，其机制可能与USP28对c-Myc的表达调控有关。