【摘 要】
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目的:研究巴山榧树组织分离产生二萜类物质紫杉醇的植物内生菌及其产生的紫杉醇类似物对肿瘤细胞的抑制作用。方法:分离纯化出植物内生菌,研究其对革兰阳性(G+)和革兰阴性(G-
【基金项目】
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湖北高校2017年省级大学生创新创业训练计划项目(编号:201711798030);湖北省普通高等学校“战略性新兴(支柱)产业人才培养计划”资助项目[湖北省教育厅鄂教高[2013]11号];省教育厅、省财政厅“专业综合改革”试点资助项目[鄂教高办[2014]6号];湖北省教育科学“十二五”规划项目(编号:2014B272);校青年自然科学基金(编号:2013dhzk003)
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目的:研究巴山榧树组织分离产生二萜类物质紫杉醇的植物内生菌及其产生的紫杉醇类似物对肿瘤细胞的抑制作用。方法:分离纯化出植物内生菌,研究其对革兰阳性(G+)和革兰阴性(G-)细菌的抗性,并对菌株BP6T3进行了分类鉴定,用高效液相色谱(HPLC)分析其代谢产物的保留时间、百分含量,液质联用仪(HPLC-MS)分析该物质形成离子片段的特征。初步探讨紫杉醇物质对Hela细胞的抑制作用,并采用添加前体物质等,以提高代谢产物产量。结果:分离得到的菌株BP6T3产生的次生代谢产物具有抗G+和G-细菌的双抗活性,该菌株经初步分类鉴定为青霉sp(Penicilliumsp)。其发酵液提取物保留时间为12.8 min,与紫杉醇对照品的保留时间基本一致。百分含量为15.8%,发酵液中紫杉醇类似物的含量达到16.59mg·L-1。HPLC-MS测定其代谢抽提物中该物质形成离子片段的特征,表明其离子片段信息与紫杉醇对照品完全一致,可初步判定青霉BP6T3可产生紫杉醇类化合物。该菌株产生的紫杉醇物质对Hela细胞有明显的抑制作用,并随着浓度的增加而增加。不同前体物质对该菌株产生紫杉醇代谢物有明显的影响,以L-苯丙氨酸为前体,产量增加最多,增长率为425.17%。结论:菌株BP6T3可被用于大规模生产抗癌药物紫杉醇。
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