一种有效纯化低拷贝质粒DNA的改良硅藻土法

来源 :细胞生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wangliang19910125

【摘要】

：

碱法制备的低拷贝质粒因含有大量杂质而无法获得有效的测序结果.为此,以纯λDNA为样品,对硅藻土纯化DNA的方法进行了优化,表明硅藻土悬液的最佳用量是20μl/μgλDNA,回收率

【作者】

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余宏傲张岚岚徐昌杰

【机构】

：

浙江大学园艺系

【出处】

：

细胞生物学杂志

【发表日期】

：

2005年6期

【关键词】

：

硅藻土盐酸胍质粒 DNA纯化 diatomaceous earth guanidine hydrochloride plasmid DNA purifica

【基金项目】

：

中国科学院资助项目，浙江省自然科学基金

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碱法制备的低拷贝质粒因含有大量杂质而无法获得有效的测序结果.为此,以纯λDNA为样品,对硅藻土纯化DNA的方法进行了优化,表明硅藻土悬液的最佳用量是20μl/μgλDNA,回收率达77.31%.应用此改良硅藻土法纯化一长为14 953 bp的低拷贝质粒pLZ14,所得质粒纯度达23.87%,比未纯化前提高了11.06倍.经纯化的pLZ14质粒测序信号强、无误认碱基,而未经纯化的质粒测序时信号弱、错误普遍存在.

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