【摘 要】
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目的:建立检测大鼠血浆中抗体偶联药物（ADC006M）[重组抗人表皮生长因子受体2（HER2）结构域Ⅱ人源化单克隆抗体-单甲基澳瑞他汀E（MMAE）偶联剂]浓度的酶联免疫吸附分析法（ELISA）,并用于研究单次静脉注射的药代动力学特征。方法:基于ELISA的检测原理，在96孔板上预先包被抗MMAE抗体，加入待测样品，用HRP标记的抗体B1G7（B1G7-HRP）进行检测，加入TMB底物显色，终止反
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目的:建立检测大鼠血浆中抗体偶联药物（ADC006M）[重组抗人表皮生长因子受体2（HER2）结构域Ⅱ人源化单克隆抗体-单甲基澳瑞他汀E（MMAE）偶联剂]浓度的酶联免疫吸附分析法（ELISA）,并用于研究单次静脉注射的药代动力学特征。方法:基于ELISA的检测原理，在96孔板上预先包被抗MMAE抗体，加入待测样品，用HRP标记的抗体B1G7（B1G7-HRP）进行检测，加入TMB底物显色，终止反应后，在酶标仪450 nm/630 nm波长处读取吸收度（A）,并参考相关法规进行方法学验证。同时，单次静脉注射给予SD大鼠5 mg·kg-1ADC006M测定其血浆浓度，对测定结果进行曲线拟合并计算药代动力学参数。结果:确定方法的线性范围为31.25～2 000 ng·mL-1,定量限为31.25 ng·mL-1;方法批内、批间准确度RE分别在-14.6%～12.6%和-13.1%～-0.7%,批内、批间精密度RSD均≤12.6%;方法的选择性（基质效应）、特异性、稀释线性与钩状效应以及各项稳定性考察结果均良好。通过对SD大鼠血浆样品进行浓度测定，获得ADC006M药代动力学参数，雌鼠、雄鼠的Cmax分别为（114 218±17 845）μg·L-1和（119 900±12 259）μg·L-1,AUC0-∞分别为（90 546±6 481）μg·L-1·d-1和（89 648±13 735）μg·L-1·d-1,t1/2分别为（1.46±0.33）d和（1.70±0.28）d。结论:本文建立的检测大鼠血浆中ADC006M浓度的ELISA方法，特异性、准确度、精密度、稳定性等均符合生物制药临床前药代动力学研究指导原则要求，ADC006M在大鼠体内的药代动力学特征不存在性别差异，其与同类ADC药物的代谢特征基本一致，具有较好的药代动力学特性。
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