【摘 要】
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通过物理吸附和共价作用机制,制备两种链亲和素-磁性微粒,即链亲和素-金磁微粒和链亲和素-氨基磁粒,并对其在不同缓冲液中的稳定性进行研究;采用酶抑制法测定两种链亲和素-磁
【机 构】
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西北大学生物芯片研发中心暨国家微检测系统工程技术研究中心,西北大学生物芯片研发中心暨国家微检测系统工程技术研究中心,西北大学生物芯片研发中心暨国家微检测系统工程技术研究中心,陕西西大北美基因股份有限公
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通过物理吸附和共价作用机制,制备两种链亲和素-磁性微粒,即链亲和素-金磁微粒和链亲和素-氨基磁粒,并对其在不同缓冲液中的稳定性进行研究;采用酶抑制法测定两种链亲和素-磁性微粒对游离生物素的结合能力;分别以紫外吸收和固相核酸杂交方法,测定两种链亲和素-磁性微粒对生物素标记寡核苷酸探针的固定化容量及活性,并与DynabeadsM-270 Streptavidin进行比较.结果表明:通过物理吸附作用制备的链亲和素-金磁微粒,适用于核酸杂交与检测常用的STE(Tris-NaCl-EDTA)缓冲系统,通过共价作用形成的链亲和素-氨基磁粒,适用于STE和磷酸盐(PBS)缓冲系统;1mg链亲和素-金磁微粒和链亲和素-氨基磁粒对游离生物素的最大结合容量分别为4950和5115pmol;对生物素标记寡核苷酸探针(24mer)的结合容量分别为2839和2978pmol,测定结果均是DynabeadsM-270 Streptavidin的6~7倍;与FITC-标记互补寡核苷酸的杂交结果表明,固定于链亲和素-磁性微粒表面的寡核苷酸探针保持了较好的生物学活性.
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