牛骨蛋白与多糖的逐级提取及分离方法研究

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为确定牛骨中蛋白质和多糖的提取及分离方法,该文在分析骨胶原蛋白和多糖存在状态的基础上,分别利用不同溶剂探讨了牛骨中蛋白质与多糖的逐级提取方法。首先碱性蛋白、酸性蛋白分别被0.6 mol/L KCl和0.5 mol/L K-P(K2HPO4/KH2PO4)溶液提取出来;0.1 mol/L HCl脱钙时溶解出酸性、中性及碱性蛋白,再经过NaOH中和后,酸性蛋白随羟基磷灰石沉淀、中性及碱性蛋白存留在上清液中;其他在胶原纤维上的有机物被0.5 mol/L NaCl和1%Na2CO3分别提取出来。各级提取有机物用SDS-PAGE电泳以及Stains All染色法、阿里新兰染色和CBB染色进行检测。利用DEAE-葡聚糖凝胶离子交换树脂有效地将碱性蛋白、酸性蛋白和多糖分离精制。
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