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目的：为进一步研究microRNA在细胞重编程机制中的作用，构建microRNA302a（miR-302a）逆转录病毒载体。方法：从小鼠基因组DNA扩增pri—miR302a，克隆至pMx-IRES-GFP逆转录病毒载体上，测序鉴定，转染PLAT—E细胞包装逆转录病毒颗粒。并进行病毒滴度测定。结果：成功构建表达miR-302a的逆转录病毒载体pMx-miR302a-IRES-GFP，阳性克隆测序结果与目标基因序列完全一致。结论：pMx-miRNA302a-IRES-GFP载体构建成功。