蝙蝠葛碱促进大鼠成肌细胞分化成熟及可能机制

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目的 探讨蝙蝠葛碱对成肌细胞分化成熟的促进作用及可能机制.方法 培养正常大鼠的成肌细胞系(L6)在含有100ng/mL蝙蝠葛碱的培养基中,21d后,通过相差显微镜观察细胞形态的变化和肌管的形成,采用RT-PCR分析肌红蛋白(MyoD)家族中肌细胞生成素(Myogenin)和肌细胞调节因子4(muscle-specific regulatory factors 4,MRF4) mRNA的表达,采用Western-blot检测Myogenin蛋白的表达.结果 随着培养时间的延长,分散的梭形成肌细胞相互聚集,逐渐形成双核连肌管和多核连肌管并产生自律性收缩.暴露于蝙蝠葛碱后,成肌细胞聚集融合形成的肌管数目明显增加,肌管直径显著增大,并产生明显的自律性收缩(未见于同期对照组).RT-PCR和Westemn Blot测表明,成肌细胞的Myogenin和MRF4的表达水平在培养5d后达到峰值.蝙蝠葛碱处理后,Myogenin峰值表达水平持续时间显著延长,MRF4表达高峰出现延迟但表达量明显升高.结论 蝙蝠葛碱可促进大鼠肌细胞分化成熟.
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